黃曲霉毒素檢測試劑盒主要是用來檢測黃曲霉的一種經(jīng)濟(jì)、快捷的檢測初篩工具,現(xiàn)在當(dāng)前市面上主要有黃曲霉毒素B1試劑盒、黃曲霉毒素M1試劑盒、黃曲霉毒素總量試劑盒。它是利用競爭酶聯(lián)免疫吸附原理定量檢測小麥、大麥、燕麥、花生、谷物中的黃曲霉毒素。用甲醇/水震蕩萃取粉碎樣品中的黃曲霉毒素,過濾水相萃取物,然后進(jìn)行免疫學(xué)檢測。
黃曲霉毒素檢測試劑盒的原理:
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
我們在做實(shí)驗(yàn)時(shí),常會(huì)遇到黃曲霉毒素檢測試劑盒顯色淡靈敏度偏低的問題,以下是根據(jù)不同問題可能原因及其防止方法總結(jié),僅供參考。
1、可能超過有效期。
超過效期試劑盒不要使用。
2、試劑開啟時(shí)間過長長菌。
試劑開啟后請盡量在短時(shí)間內(nèi)用完。
3、恒溫箱溫度不足37℃或水浴鍋水溫度不足37℃。
放入反應(yīng)板時(shí)注意培養(yǎng)箱溫度,及時(shí)調(diào)整,孵育反應(yīng)期間開啟不宜太多,影響溫度平衡。
4、移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸頭內(nèi)壁掛液太多或內(nèi)壁不清潔。
校正移液器,吸頭要配套,每次裝吸頭要吻合緊密。移液不宜過快,排放完。吸頭內(nèi)壁要清潔,最好一次性使用。