黃曲霉毒素是一組結(jié)構(gòu)相關(guān)的毒性化合物,由真菌黃曲霉菌和寄生曲霉菌在受到像干旱這樣的外界環(huán)境壓力下產(chǎn)生的,主要有B1、B2、G1和G2四種。1993年黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織劃定為1類致癌物,是一種毒性的劇毒物質(zhì)。其危害性在于對(duì)人及動(dòng)物肝臟組織有破壞作用,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1最為多見,其毒性和致癌性。
黃曲霉毒素檢測(cè)試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA,在微孔板上預(yù)包被黃曲霉毒素抗原,加入樣本/黃曲霉毒素總量標(biāo)準(zhǔn)品溶液及辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素總量抗體。樣本或標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的黃曲霉毒素與預(yù)包被在微孔板上的黃曲霉毒素抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素總量抗體。未結(jié)合的酶標(biāo)抗體在洗滌時(shí)被除去,再加入TMB顯色液,讀取吸光值。樣本的吸光值與其所含殘留物黃曲霉毒素總量的含量成負(fù)相關(guān)。對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可得出相應(yīng)殘留物黃曲霉毒素總量的含量。
目前,該檢測(cè)試劑盒可定性、定量檢測(cè)玉米、大米、麥類、豆類、花生、飼料、食用油等樣本中的黃曲霉毒素總量。
當(dāng)然我們?cè)谑褂迷摦a(chǎn)品時(shí),還需要留意以下事項(xiàng):
由于實(shí)驗(yàn)的需要,黃曲霉毒素檢測(cè)試劑盒包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來(lái)包。
由于蛋白質(zhì)與聚苯乙稀固相載體是經(jīng)過(guò)物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體外表的疏水基團(tuán)間的效果。
這種物理吸附長(zhǎng)短特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)一般含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體外表。小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才干固定在固相載體上。