嘔吐毒素免疫親和柱是如何進行樣品處理的？
點擊次數(shù)：929 更新時間：2022-11-30
嘔吐毒素，又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，多分布于小麥、大麥、玉米等谷物籽實中, 對人體有一定危害作用，歐盟分類標準為三級致癌物。嘔吐毒素免疫親和柱通過嘔吐毒素抗原與抗體的特異性結(jié)合，將毒素從樣本中選擇性分離，從而達到凈化的效果。那么對于嘔吐毒素免疫親和柱的樣品是如何進行處理的呢？下面我們來詳細了解下！
方法一：酒類
取脫氣的酒類樣品加入聚乙二醇8000，用PBS緩沖液定容；高速均質(zhì)；用快速定性濾紙過濾，收集濾液；再用微纖維濾紙過濾，并收集濾液作為上樣液；取上樣液過免疫親和柱凈化。
稀釋倍數(shù)：2
方法二：醬油、醋、醬及醬制品；
取樣品，加入聚乙二醇8000，用PBS緩沖液定容；高速均質(zhì)；用快速定性濾紙過濾，收集濾液；再用微纖維濾紙過濾，并收集濾液作為上樣液；取上樣液過免疫親和柱凈化。
稀釋倍數(shù)：2
方法三：糧食及飼料
1.玉米、小麥、面粉、配合飼料、濃縮料、精補料等吸水性較小的樣本；
稱取粉碎樣品，聚乙二醇8000，加入蒸餾水；高速均質(zhì)；用快速定性濾紙過濾，收集濾液；再用微纖維濾紙過濾，并收集濾液作為上樣液；取上樣液過免疫親和柱凈化。
稀釋倍數(shù)：2
2.麩皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性較強的樣本；
稱取樣品，聚乙二醇8000，加入蒸餾水；高速均質(zhì)；用快速定性濾紙過濾，收集濾液；再用微纖維濾紙過濾，并收集濾液作為上樣液；取上樣液過免疫親和柱凈化。
稀釋倍數(shù)：2
注意事項：
1.使用前，免疫親和柱需回至室溫(22～25℃)。
2.親和柱2～8℃儲存，不得凍存。
3.不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
4.取樣量：根據(jù)需要可以適當增加或減少取樣量，注意提取液量要相應(yīng)改變。
5.pH：親和柱的上樣溶液pH需在6～8之間，若偏離此范圍需要用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。
6.由于樣本中嘔吐毒素的含量普遍較高，如果計算后樣本含量大于4mg/kg時，表示已經(jīng)超過親和柱柱容量，需要適當降低上樣液的體積，重新檢測。
7.上機檢測時的溶劑與流動相保持一致可以消除溶劑效應(yīng)的影響。
8.嘔吐毒素可致癌，應(yīng)戴手套操作。
9.使用過的容器及標準品溶液最好用次氯酸鈉溶液(5%V/V)浸泡過夜。
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